蛋白水解物因可以提高各种生物制药生产系统的整体性能而常被用于 生产工艺中 ，比如改善细胞活力、提高细胞增殖和目的蛋白产量、提高病毒培养滴度等等。然而，在一个限定系统中，可能难以同时观察到这些作用，因为每种细胞培养平台都是独一无二的，作为培养基添加物的蛋白水解物也是如此。每种水解物对细胞的生长和生产力都具有不同的作用并会受到多种因素的影响，如细胞系、生产水解物的原材料、生产工艺、水解物用量以及基础培养基的成分等等。

为了满足市场需求，dafabetcasinoonline苹果手机网页版登录代理的 KERRY 品牌 从上世纪以来 ，充分利用在细胞培养基添加物领域中先进的技术与专业积累， 开发出了 一系列 非动物源 复合 添加物系统 ，大大提升了各类细胞系的性能，能有效降低生产成本、简化筛选工艺， 满足了生物制品领域客户的 生产和监管 要求 。

KERRY 非动物源 复合添加物系统优势特点：

• 功能更加强大 —— 集合了KERRY传统产品中植物蛋白水解物和成分明确添加物二者在培养效果上的优点 ；
• 产品线更加合理 —— 根据 客户对下游纯化要求的不同， 分别开发出 了含有生长因子的增强版和对下游纯化无影响的无蛋白版本；
• 针对性更强 —— 对于 CHO 细胞、杂交瘤细胞、禽类细胞、昆虫细胞以及常用于疫苗生产的 各类 细胞 系 都有专门对应的复合添加物产品。

本 文中 小编将 重点 为大家介绍常用于疫苗研发 和 生产的 Sheff-Vax 系列 复合 添加物。

1. Sheff-Vax 复合 添加物 介绍

Sheff-Vax 复合添加物 是一类成分复杂、 不含 动物源 成分 （ ACF ）的培养基添加物系统， 根据 是否 不含蛋白（ PF ）、 添加 微量元素（ Plus ）等各类 主要 成分的 差异 ， 分为 以下 五个产品（见下表）。 Sheff-Vax 作为细胞培养基的添加成分， 能 部分或完全替代血清，为多种 类型细胞 （如 BHK 、 Vero 、 SF-9 、 MDCK 、 MRC5 等 ） 提供生长和生产所需的 各类 营养，包括 氨基酸、多肽、碳水化合物、维生素、微量元素等 ， 不仅能 显著提升细胞 生长状态，还 能 提高病毒产量，因而常常被用于 病毒 疫苗的研发和生产 。 Sheff-Vax 系列添加物已经在多个上市疫苗生产工艺中被添加和 使用 ，如口蹄疫疫苗、戊肝疫苗、流感疫苗等，也是全球多家细胞培养基生产商 的 常用原料之一。

产品名称	特点与应用
Sheff-Vax ACF	一种成分复杂的培养基添加物，含有生长因子，可显著减少 如 MDCK 、 BHK- 21 和 HEK293 等细胞 培养时的血清使用量。 6- 8g/L 添加量 即可 满足细胞在 DMEM 和 GMEM 培养基中贴壁或悬浮培养的需求，效果优于完全使用血清培养的细胞。
Sheff-Vax Plus ACF	与 Sheff-Vax ACF 相比 添加了各种微量元素 ，赋予细胞旺盛的生长力，同时增加细胞的蛋白产量和 存活时间。 Sheff-Vax Plus ACF 配合基础培养基使用，可以使 MDCK 、 BHK-21 等细胞实现完全无血清的悬浮培养。
Sheff-Vax PF ACF	是 Sheff-Vax ACF 的无蛋白版本，不含完整无损的蛋白质，适用于对下游纯化有特别要求的细胞培养。 分批培养时，推荐添加量为 7- 9g/L 。
Sheff-Vax Plus PF AC F	是 Sheff-Vax Plus ACF 的无蛋白版，不含完整无损的蛋白质，适用于 对下游纯化有特别要求的细胞培养。分批培养时，推荐添加量为 7-9g/L 。
Sheff-Vax Plus PF ACF VP	是一款无动物源成分、无蛋白的培养基添加物，用于疫苗生产的病毒繁殖阶段，提高病毒滴度的同时限制蛋白的表达，方便下游病毒纯化。该产品在贴壁或悬浮细胞中推荐添加量为 6- 8g/L 。

* 注： ACF - Animal Component Free 不含 动物源成分； PF - Protein Free 不含 蛋白 质 ； Plus – 含有 微量元素 。

 

2. 如何选择和使用 Sheff-Vax 添加物

在实际应用中发现，上述五种 Sheff-Vax 添加物对不同类型细胞系的适用性表现也有一定差异，dafabetcasinoonline苹果手机网页版登录可以根据下表来选择和测试合适的 Sheff-Vax 添加物。 对于使用商品化 无血清培养基和其他培养基的客户， Sheff-Vax 添加物系统也可以用来优化培养基，提高细胞生产效率和促进细胞增长。这种情况下无需驯化细胞， Sheff-Vax 可直接 添加到 无血清培养基中。 Sheff-Vax 添加物的高活性和稳定性，使其可以应用于大多数商业培养基。 

添加物	细胞系
	H EK	Vero	PerC 6	MRC- 5	BHK	CEF	MDCK	SF-9	High-five	S 2
Sheff-Vax ACF	●	●	★			★		★	★	★
Sheff-Vax Plus ACF	●	●	★	●			★	★	★	★
Sheff-Vax PF ACF	●	●	★		★	★		★	★	★
Sheff-Vax Plus PF ACF	●	●	★			★		★	★	★
Sheff-Vax Plus PF ACF VP	★	★	★	★	★	★	★	★	★	★

* 注： ● 有效； ★  更加 有效。

Sheff-Vax 添加物 的 配置 方法

 
    使用 Sheff-Vax 添加物替代血清的培养过程中，需要 先 进行细胞驯化 ， 逐代 降低血清 浓度， 同时 增加 Sheff-Vax 添加物浓度 ，进而 实现 降低 或完全去除血清和其他动物源成分的培养方案，如下表所示。

细胞传代次数	对照组	驯化组
1	100% 对照培养基	100% 对照培养基 + 0% 驯化培养基
2	100% 对照培养基	75% 对照培养基 + 25% 驯化培养基
3	100% 对照培养基	50% 对照培养基 + 50% 驯化培养基
4	100% 对照培养基	25% 对照培养基 + 75% 驯化培养基
5	100% 对照培养基	0% 对照培养基 + 100 % 驯化培养基

* 注：对照培养基：基础培养基 +10% FBS ； 驯化培养基：基础培养基 +Sheff-Vax 添加物 。

 

3. Sheff-Vax 添加物 应用案例

       1 ） 使用 Sheff-Vax Plus PF ACF 对 BHK 细胞 的 降 血清驯化案例

BHK 细胞降血清培养生长曲线对比

   该驯化培养过程添加了 Sheff-Vax Plus PF ACF 来降低 BHK 培养 基 中 FBS 的使用量，把 FBS 浓度从 1 0% 降低到 0. 5% 依然可以 保持 很好的细胞生长状态。（注：在 整个 驯化 传代过程中，培养基需要 添加 0.5% 的 PluronicF-68 来防止细胞凝聚成团。）

 

         2 ） 使用 Sheff-V ax ACF 对 Vero 细胞 的无 血清驯化 案例

使用 Sheff-Vax 添加物可以实现 Vero 细胞的无血清培养， 在 逐步减少血清 用量 直至完全去除血清后， Vero 细胞 生长 形态无显著变化 （见下图） 。

Vero 细胞生长形态对比

（ A ）对照组： DMEM+ 10% 胎牛血清；

（ B ）实验组： DMEM+ 0% 胎牛血清 +2g/L Sheff-V ax ACF + 10mg/L r Insulin 。

 

每次传代逐步减少 FBS ，同时添加 Sheff-Vax ACF ，在相同培养时间内，无血清组细胞生长密度可达到 1 0% FBS 组细胞密度峰值的一半，延长培养时间还可以获得更高的细胞密度（见下图）。

Vero 细胞生长曲线对比

(i) 10% FBS, (ii) 7.5% FBS, (iii) 5% FBS,(iv) 2.5% FBS, (v) 1.5% FBS, (vi) 1% FBS, (vii) 0.5% FBS, (viii) 0.25% FBS, (ix) 0.1% FBS, (x) 0% FBS

 

3 ） 添加 Sheff-Vax 可以获得更高的病毒滴度

分别在 培养 狂犬病毒和麻疹病毒 的细胞培养基中 添加不同的 Sheff-Vax 产品， 与对照组相比 均能有效提升病毒 生产 滴度。在病毒增殖阶段添加 Sheff-Vax Plus PF ACF VP 对病毒滴度也有显著 的 提升（见下图）。

添加 Sheff-Vax 培养的病毒滴度对比

 

  综上所述 ， Sheff-Vax 复合添加物在疫苗研发生产过程中具有 非常多的优势，主要表现为：

• Sheff-Vax 是一系列 非常 适用于细胞疫苗生产的 非动物源添加物；
• Sheff-Vax 具有可靠的批间 一致性 ；
• Sheff-Vax 能 发挥 出 与血清相同的生物学功能 ；
• Sheff-Vax 能有效提升病毒疫苗的生产效率；
• Sheff-Vax 的高性价比能显著降低生产成本。

 

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